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磷酸化抗体制备

发布时间:2013-10-30 21:06:07  浏览次数:

     蛋白可逆性磷酸化调节是生物体内存在的普遍的调节方式,几乎涵盖生物体内所有的生理、病理过程:糖原的分解与代谢、动植物光合作用、基因的变异、神经递质的合成与释放、肿瘤基因的变异等,蛋白酸化的调节在细胞信号传导及凋亡过程中起到了很重要的作用,是维系细胞生命的活动调控中枢。


    磷酸化抗体可以识别蛋白质的磷酸化或者非磷酸化的存在形式,对磷酸化蛋白进行定性、定量分析,为研究磷酸化蛋白的科研工作者,提供更加方便快捷可靠的服务。近年来,随着对蛋白质科学研究步伐的加快,使用磷酸化抗体的学者明显增多,尤其是在细胞信号传导及凋亡的研究过程中受到重视。我公司除有计划、有重点的开发一些磷酸化抗体外,对需要其他磷酸化抗体的研究人员和课题进行磷酸化抗体提供制备服务。

磷酸化抗体实验方案
    为客户合成磷酸化多肽和非磷酸化多肽各一条,二者的差别仅为其中某一个氨基酸的磷酸化与非磷酸化,其余序列完全一样。磷酸化多肽与KLH偶联物作为免疫原免疫新西兰大白兔2只, 4次免疫得到的抗血清经ELISA检测效价达到要求即采血分离、收集抗血清。抗血清在经过预纯化后上磷酸化多肽交联的亲和层析柱纯化,得到的抗体再经非磷酸化多肽交联的亲和层析柱吸收。得到的抗磷酸化抗体经BSA交联的磷酸化多肽与非磷酸化多肽的双重检测确认,质量合格,最终交付给客户。


服务内容


1. 合成达到18个氨基酸非磷酸化多肽
2. 合成达到18个氨基酸磷酸化多肽
3. 将磷酸化多肽连接于一个载体蛋白
4. 4周抗体制备流程,包括2只兔并提供1次免疫前血清采集,4次免疫和每只动物4次放血(大概20-25ml血清每只),总共接近160-200ml多抗血清
5. ELISA检测第一次抽血的血清抗体效价
6. 亲和纯化25ml第三次抽血收集的抗非磷酸化多肽抗体血清
7. 亲和纯化25ml第三次抽血收集的抗磷酸化多肽抗体血清
服务价格

服务编号 宿主 服务内容 抗原 价格
1-4101 磷酸化多克隆抗体制备 委托合成 9,900.00
1-4102 磷酸化单克隆抗体制备服务 委托合成 25,060.00

 

注:合成抗原大于18个氨基酸时,每多一个氨基酸,加收150元/氨基酸。


服务指南
1、辅助抗原设计包括在服务中不额外收费;
2、一般说来45-55mg多肽用于合成(达到免疫纯度标准);
3、客户将收到整个过程所有剩余的多肽;
4、一般会在多肽的N或C端增加一个半胱氨酸(如果没有内部半胱氨酸存在于序列)为了连接于载体蛋白,不额外收费;
5、25ml第三次采集的血清会首先通过非磷酸化亲和层析柱以除去识别非磷酸化蛋白的抗体;
6、25ml第三次采集的血清会再通过磷酸化亲和层析柱以分离出仅识别磷酸化蛋白的抗体;
7、两种亲和层析柱(磷酸化和非磷酸化)包括在服务中,其他额外的纯化可以在您自己的实验室进行;
8、25ml抗体血清平均可以获得2-3mg特异性抗体。

 

服务流程
您可以通过多种方式和我们联系

1.在线客服;
2.电话订购: 021-51353134
3.邮件联系: sales@top-peptide.com

淘普(上海)生物科技有限公司